La PCR digitale (dPCR) è una tecnica che divide il sistema di reazione PCR in un gran numero di minuscole unità di reazione (come goccioline, microcamere, ecc.), garantendo che ciascuna unità contenga solo 0, 1 o poche molecole bersaglio. Successivamente, ciascuna unità viene amplificata in modo indipendente e viene contato il numero di unità positive, ottenendo così una quantificazione assoluta delle molecole di acido nucleico target.
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Domande frequenti
D: Quali sono i vantaggi della PCR digitale rispetto alla qPCR?
R: Vantaggi principali della PCR digitale rispetto alla qPCR
I cinque vantaggi principali della PCR digitale
Tutti questi vantaggi derivano dal principio fondamentale del "partizionamento" e del "conteggio assoluto degli endpoint".
1. Quantificazione assoluta senza curva standard
2. Sensibilità ultra-elevata e rilevamento di varianti rare
3. Precisione e riproducibilità superiori
4. Maggiore tolleranza agli inibitori della PCR
5. Indipendenza dall'efficienza di amplificazione
D: PCR digitale, qPCR ed emocoltura per il confronto nel rilevamento di infezioni del sangue
A:
| Caratteristica | PCR digitale | qPCR | Emocoltura |
| Principio fondamentale | Conteggio assoluto degli acidi nucleici endpoint | Quantificazione relativa degli acidi nucleici relativi in tempo reale- | Crescita e coltivazione microbica |
| Obiettivo di rilevamento | Acidi nucleici specifici dell'agente patogeno-(DNA/RNA) | Acidi nucleici specifici dell'agente patogeno-(DNA/RNA) | Microrganismi vitali e coltivabili |
| Tempo di consegna | Veloce (Il nostro TAT 3 ore) | Veloce Ma Filmarray BCID2 si basa su emocolture positive |
Lento (2-5 giorni, media . 24-48 ore) |
| Sensibilità | Eccezionalmente alto (livello-copia singola) | Alto | Lower (requires >10-100 UFC/mL) |
| Quantificazione | Assoluto (copie/mL) | Relativo (valore Ct, necessita di curva standard) | Semi-quantitativo (tempo-alla-positività, conteggio delle colonie) |
| Effetto degli antibiotici | Nessun effetto (rileva l'acido nucleico da organismi vivi/morti) | Nessun effetto (rileva l'acido nucleico da organismi vivi/morti) | Impatto grave (gli antibiotici precedenti possono causare falsi negativi) |
| Tolleranza agli inibitori | Eccellente, altamente tollerante agli inibitori del sangue | Più debole, suscettibile agli inibitori del sangue | N/A, ma soggetto a inibizione microbica |
| Copertura degli agenti patogeni | Mirato, richiede una sequenza nota | Mirato, richiede una sequenza nota | Ampio-spettro imparziale, in grado di rilevare agenti patogeni sconosciuti/rari |
| Valore clinico primario | Diagnosi precoce, precisa e quantitativa | Questa tecnologia è ampiamente applicata in scenari basati su campioni di emocolture positive. | Diagnosi definitiva e guida terapeutica (Gold Standard, Slow) |
Essendo uno dei principali produttori e fornitori di PCR digitale in Cina, offriamo una vasta gamma di prodotti di qualità superiore. Non esitate a vendere PCR digitale personalizzata all'ingrosso dalla nostra fabbrica. Contattaci per maggiori dettagli.
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